不同昆蟲響應各種植物次 生代謝物質的解毒酶基因存在差異。美國白蛾體內 響應槲皮素誘導的 P450 基因的種類以及這些基因 對槲皮素的響應模式和機制尚不清楚。恒溫培養(yǎng)箱(寧波江南儀器廠,中國), 電泳儀(六一生物,中國北京),體視顯微鏡(徠卡, 德國)PCR 儀、CFX96 型實時熒光定量 PCR 檢測系 統(tǒng)(Bio-Rad,美國),凝膠成像系統(tǒng)(Aplegen,美國),超微量紫外分光光度計 NanoDrop 8000(Thermo, 美國),超凈臺(蘇州凈化,中國),臺式離心機、 搖床、超低溫冰箱(Thermo,美國),普通冰箱(海 爾,中國青島),微量注射器(哈美頓博納圖斯,瑞 士),恒溫水浴鍋(上海精宏,中國),電子天平 (Sartorius,德國)。
P450 是一類廣泛分布于生命有機體的代謝酶系, 在植食性昆蟲的生長發(fā)育、激素生物合成、解毒代謝 等過程中發(fā)揮著多種生理功能。從美國白 蛾的中腸轉錄組中篩選出了響應槲皮素誘導而顯著差 異表達的 5 個 P450 基因,除 CYP4G297 外,其余均 為美國白蛾物種中新鑒定的解毒酶基因。導致幼蟲出現(xiàn) 體重增加量減少以及死亡率顯著升高的現(xiàn)象。但由于 本研究設置的槲皮素濃度梯度有限,美國白蛾幼蟲對 槲皮素耐受的濃度范圍還不明確,在將來的研究中可 以增加槲皮素飼養(yǎng)試驗的濃度梯度設置,對參與槲皮 素解毒代謝的多基因進行沉默。