ASFV 基因組可編碼 150 個 ~200 個蛋白質(zhì), 大多與病毒復制、組裝、細胞凋亡、免疫功能、炎癥反 應(yīng)等有關(guān)。p54是 ASFV 編碼的主要結(jié)構(gòu)蛋白之 一,在病毒的吸附和侵入過程起重要作用,病毒進入 機體后可產(chǎn)生針對該蛋白的抗體,抗體檢測陽性即 代表存 在 ASFV 感 染。p54 蛋 白 有 很 強 的 保 守 性,是良好的 ASF 血清學診斷靶點。電子天平,上海精天電子儀器 有限公司產(chǎn)品;瓊脂糖水平電泳槽,北京六一生物科 技有限公司產(chǎn)品;PCR 擴增儀、電泳儀、小型垂直電 泳槽、小型轉(zhuǎn)印槽,美國伯樂公司產(chǎn)品;光凝膠成像 系統(tǒng),上海勤翔科學儀器有限公司產(chǎn)品;超速低溫離 心機、電熱恒溫培養(yǎng)箱,上海精宏實驗設(shè)備有限公司 產(chǎn)品。
采用的 pColdTF 載體是一種帶有 His 標簽及 TriggerFactor(TF)可溶性標簽的冷休克表 達載體,這類載體帶有cspA(冷休克蛋白 A)啟動子 及相關(guān)元件,使得低溫條件下更利于目的蛋白的表 達,同時 抑 制 其 他 細 胞 蛋 白 質(zhì) 的 表 達。實 際 應(yīng) 用 pColdTF 載 體 表 達 目 的 蛋 白 時,多 選 擇 15℃ 或 16℃誘導蛋白的表達。